间充质干细胞(MSC)如何培养与鉴定?
相比于胚胎干细胞或神经干细胞,MSC具有易获取、易体外培养、传代稳定性、低免疫原性等优势,在体外经过多次传代后仍具有多向分化和自我复制的潜能,且MSCs多来自于成年的组织,研究过程的道德和伦理学问题较小。
MSC的大小与形状具有异质性,即不同种属或不同组织的MSC具有不同的生长形态,例如三极形、长梭形、小圆形、短梭形和扁平形态。几乎所有的MSC都是贴壁生长,具有较强的贴壁能力,而MSC的原代分离也正是利用了MSC强贴壁的特性。例如,骨髓MSC的分离方法为:将从组织中分离出来的单个核细胞悬浮培养于含有FBS的培养基中,1~2天后去除非贴壁细胞,保留贴壁细胞再培养2-3周即可获得。此外也可采用免疫磁珠对MSC进行分选,但这种方法成本较高。
对于MSC的鉴定,常采用的方式包括形态学鉴定,表面标志物鉴定和多系分化潜能鉴定。MSC一般呈纤维细胞样生长,细胞在支持物表面呈梭形或不规则三角形生长,细胞中央有卵圆形核,胞质向外伸出2-3厘米长短不同的突起。MSC的细胞表面标志物则常采用流式细胞仪进行鉴定,不同组织来源的MSCs可共享相同的细胞表面标记,如CD29和CD44。但目前我们对MSC表面分子标志物的研究还不完善,已发现的表面标志物也存在特异性不强的问题,为了让我们更好地分离、培养和鉴定MSC,需进一步不断发现新的特异性标志物。
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1. 骨髓MSC(不同种属)+完全培养基+诱导分化培养基+冻存液
OriCell®骨髓MSC来源人或合格实验动物的骨髓,经传代扩增至第二代冻存,具有良好的复苏活性,每批细胞均且通过微生物检测、表面标志物鉴定、增殖能力及分化潜能检测。
2. 脂肪MSC(不同种属)+完全培养基+诱导分化培养基+冻存液
OriCell®脂肪MSC来源健康成人或合格实验动物的脂肪组织,经传代扩增至第二代冻存,复苏活性高,具有良好的增殖和分化潜能,可分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞等。
3. 脐带/脐血MSC+完全培养基+诱导分化培养基+冻存液
OriCell®脐带/脐血MSC是从健康自然分娩的胎儿脐血/脐带组织中分离的间质干细胞,具有良好的体外扩增能力和分化潜能,适用各类动物疾病模型尤其是神经系统疾病模型的研究。
备注:种属包括人、小鼠、大鼠、狗、兔等。
关于OriCell®
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