NIH/3T3——小鼠胚胎成纤维细胞系培养
NIH/3T3是研究人员从NIH Swiss小鼠胚胎中分离纯化建立的成纤维细胞株，“3T3”是指该细胞的处理方式，每次在固定培养面积接种3×105个细胞，每3天传代一次。原始的小鼠胚胎成纤维细胞具有极强的接触抑制特性，但在长期培养传代过程中逐渐丢失了这一特性，不过，在特定的实验条件下，其接触抑制相关的研究仍具有重要意义。
有研究证明NIH/3T3对肉瘤病毒和白血病病毒敏感，细胞易于转染，特别适用DNA转染研究，这一特性使其在病毒学和肿瘤学相关研究中发挥了重要作用，例如可用于研究病毒感染细胞的机制、病毒诱导细胞转化等。
细胞名称：小鼠胚胎成纤维细胞
OriCell®细胞货号：M5-0301
OriCell®培养基货号：CMM5-0301（500mL），DMM5-0301（200mL）
生长特性：贴壁生长；成纤维细胞样
培养条件：DMEM（高糖）+10% 胎牛血清
培养环境：95%空气+5%二氧化碳；37℃
NIH/3T3细胞镜下形态
注意事项：
注意细胞密度，在80%之前就开始传代，不要等到细胞长的过满或者开始融合时才传代，传达比列1:3~1:4。
细胞培养常见问题解答
物流运输路上受到颠簸，可能会造成细胞脱落，脱落的细胞悬浮在培养基中，导致不易聚焦。
解决方法：把细胞放进培养箱静置2h，待脱落细胞重新贴壁后就可以看到了。如果静置后看到的细胞仍偏少，请将培养瓶中的培养基全部转移到离心管中，265×g的速度离心4min，即可看到细胞沉淀，沉淀重悬接入原培养瓶继续培养即可。
胎牛血清中所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与新生牛血清不同，胎牛血清养分更为充足，只要控制好细胞密度，以防细胞过度生长而失去接触抑制特性即可。本库细胞已经过严格的体系验证，可放心使用。
OriCell®NIH/3T3细胞系完全培养基包含适合NIH/3T3细胞系生长所需的基础培养基、OriCell®标准级胎牛血清（乌拉圭原装血源，适合常规细胞系培养）。
小鼠胚胎成纤维细胞系（3T3-Swiss albino）是1962年由G. Todaro 和 H. Green从分解的Swiss小鼠胚胎中建立，其生长特性为接触抑制型。
小鼠胚胎成纤维细胞系（NIH/3T3）来自NIH Swiss小鼠，是一个多克隆群体，存在明显的克隆畸变，有易发生细胞转化的亚克隆细胞群，虽然原始细胞受到极大的接触抑制，但由于上述原因，细胞系逐渐失去了这种特性。
NIH 3T3细胞实验应用
01 绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白及其TM亚基通过激活Akt诱导NIH/3T3细胞转化
该研究利用JSRV Env及其亚基真核细胞表达质粒分别诱导转化NIH/3T3细胞和稳定表达JSRV受体绵羊Hyal-2的NIH/3T3-Hyal2-HA 细胞，发现Env及其穿膜蛋白亚基（TM）均具有诱导细胞转化、激活Akt的能力，且TM亚基可能在细胞转化中起主要作用，而绵羊Hyal-2具有抑制JSRV Env诱导NIH/3T3细胞转化的作用，同时该转化过程与肿瘤相关基因突变无关基因表达和调控的研究。由于其生长迅速且易于转染外源基因，这些细胞成为基因工程和基因治疗研究中的重要工具。科学家们可以利用NIH/3T3细胞研究特定基因对细胞生长、分化和凋亡等过程的影响，为疾病的治疗提供新的思路和方法。
采用DNA 重组技术构建以绿色荧光蛋白（GFP）为报告基因的重组腺相关病毒载体和报告病毒，将其转染NIH/3T3细胞后，观察到GFP在细胞中的有效表达，为介导基因转移至真核细胞进行基因治疗提供了参考依据。
研究从未用过抗癌细胞毒药物的非小细胞肺癌患者的手术标本中提取癌细胞基因组总DNA，转染小鼠成纤维细胞NIH/3T3，发现二轮转化细胞具有肿瘤细胞的特性，如能在软琼脂上存活生长、接种裸鼠能长出肿瘤等，并且确定了转化细胞中的转化基因之一为ha-ras癌基因，提示吸烟可能是人肺鳞癌发生和ha-ras活化的重要因素。
赛业生物NIH/3T3细胞产品服务
1. NIH/3T3细胞现货及配套试剂
赛业OriCell®为科研人员提供稳定且质量可靠的NIH/3T3（货号M5-0301）细胞供应及支持，细胞通过细菌、真菌、支原体、内毒素检测及STR鉴定，还可提供细胞所需的各类培养试剂。
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产品名称 |
详情 |
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OriCell®NIH/3T3细胞系 |
货号M5-0301，规格1×106 |
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OriCell®NIH/3T3细胞系完全培养基 |
货号CMM5-0301（500mL），货号DMM5-0301（200mL） |
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OriCell®NIH/3T3基因敲除细胞株现货 |
基因敲除Smo、4933427D06Rik等多种基因，详情请咨询 |
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OriCell®标准级胎牛血清 |
货号FBSST-01033，规格500mL，乌拉圭血源 |
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OriCell®通用血清型非程序冻存液 |
货号NCRC-10001，规格20mL/50mL |
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OriCell®通用型无蛋白非程序冻存液 |
货号NCPF-10001，规格20mL/50mL |
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OriCell®Easy Transfection Reagent |
货号ETFR-10001，规格250μL*2 |
2. NIH/3T3细胞基因编辑
NIH/3T3细胞易于转染，因此常用于实验室转染及基因表达的研究。依托成熟稳定的细胞技术服务平台，赛业生物可提供NIH/3T3细胞系的基因修饰包括基因敲除、点突变、基因敲入、过表达和干扰等，以及细胞常规功能及特性检测等服务。
参考文献：
1. Jainchill JL, et al. Murine sarcoma and leukemia viruses: assay using clonal lines of contact-inhibited mouse cells. J. Virol. 4: 549-553, 1969.PubMed:4311790
2. Copeland NG, Cooper GM. Transfection by exogenous and endogenous murine retrovirus DNAs. Cell 16: 347-356, 1979. PubMed: 222457
3. Loffler S, et al. CD9, a tetraspan transmembrane protein, renders cells susceptible to canine distemper virus. J. Virol. 71: 42-49, 1997. PubMed: 8985321
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