外泌体定制/服务
外泌体(Exosome)是一种直径为30~150nm的亚细胞囊泡结构, 电子显微镜下呈球状或杯状, 其天然存在于各种体液(如血液、唾液、尿液和母乳)中。在过去,外泌体一直被认为是细胞的废弃物,但近几年发现,外泌体这种微小膜泡中含有细胞特异的蛋白、脂质和核酸,能作为信号分子传递给其他细胞从而改变其他细胞的功能。
外泌体参与了机体不同的生理和病理过程,并对细胞活动发挥重要的调控作用,如免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、肿瘤侵袭等。且外泌体具有细胞类型特异性,即不同细胞分泌的外泌体的组成成分和功能不同,这使得外泌体具有成为多种疾病早期诊断标志物的潜力。此外,外泌体在作为基因和药物运载、肿瘤和肿瘤生物学等方面也已经成为研究热点。
一、外泌体提取鉴定技术服务
1、样本预处理与外泌体提取、保存
(1)样品预处理:外泌体存在于人类或动物的各种体液中,如细胞培养上清、血液、尿液等,我们可以选择不同的样本来源进行相关的外泌体研究。不同的实验样本采集时需要注意的地方不一样,如细胞培养上清在收集样本前需换成无外泌体血清或者培养基培养,以降低背景值的干扰。
(2)外泌体提取:我们采用差速超速离心方法进行外泌体的分离,该方法是公认的“金标准”,也是高分文章中首选的分离方法。此外,我们也可提供针对细胞培养上清来源的外泌体提取试剂盒(货号EEKC-10001),无需超速离心,省时更省力。
(3)外泌体保存:提取的外泌体4℃保存,保质期为一周;-80℃可长期保存,避免反复冻融。
2、外泌体鉴定分析:
提取后的外泌体需要经过一系列鉴定才能确定提取的是外泌体,一般有以下三个鉴定标准:
(1)透射电镜:简称TEM,观察外泌体双层囊膜超微结构;
(2)纳米颗粒跟踪分析:简称NTA,检测外泌体粒径及浓度等信息;
(3)Western Blot分子标志物检测:检测外泌体标志蛋白,如CD9、CD63等四跨膜蛋白家族,细胞质蛋白如Actin、热休克蛋白如HSP70等。
3、外泌体体外实验
(1)外泌体测序
外泌体RNA测序是在高通量测序平台下对18~32nt的RNA片段测序,然后对数据进行有效序列统计分析,最终获得样品中各种RNA的表达信息用于后续分析。
(2)MicroRNA相关调控
客户可通过RNA测序来选择想要进行分析的RNA,通过转染对应的inhibit RNA来调控对应RNA的表达,从而进行下游相关机制的研究。
(3)外泌体-细胞互作
客户可根据文献或研究方向选择具有功能性的细胞,提取该类细胞的外泌体备用。将外泌体与研究细胞进行共孵育,通过外泌体与细胞之间的相互作用研究外泌体作用机制,也可添加相关药物研究外泌体干预效果。
运输条件:快递寄送,干冰运输。随样附上样品信息、数量、日期。
服务周期:根据项目情况具体协定。
二、外泌体产品
OriCell®具有多物种多组织来源的干细胞、体细胞及细胞系产品,细胞种类齐全,可满足绝大部分客户的需求,我们可为您提供定制化的外泌体产品服务。也可以根据您的需求进行外泌体生产定制,提供外泌体粒径、电镜、WB等检测结果。
此外,OriCell®提供相关的外泌体现货产品,产品按蛋白量进行交付,提供同批次外泌体的粒径、电镜、WB等检测结果。
项目 |
外泌体定制 |
外泌体产品 |
细胞类型 |
干细胞/细胞系 |
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外泌体需求量 |
蛋白量(μg) |
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交付内容 |
粒径检测 |
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电镜检测 |
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WB(CD63、HSP70、TSG101) |
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周期 |
3-6周 |
1周 |
库存状态 |
定制 |
现货 |
三、外泌体相关试剂产品
在外泌体相关的研究中,如果是从细胞培养的上清液中获取外泌体,则需要使用不含外泌体的胎牛血清进行培养,从而规避普通胎牛血清中含有大量牛源外泌体的干扰。
适用范围:用于细胞外泌体相关的研究,如收集目标细胞的上清液外泌体。
针对各类间充质干细胞的外泌体研究专研的完全培养基,产品类型丰富。套装内包含基础培养基、去外泌体血清以及适合细胞生长的营养添加物,通过多种细胞培养测试,适合各类间充质干细胞的直接培养并提取外泌体。
使用新西兰原装进口的胎牛血清,采用去外泌体处理,确保了胎牛血清原本优良的细胞培养特性,适合各类间充质干细胞的培养,无需过渡,可直接培养间充质干细胞并提取外泌体。
OriCell®外泌体提取试剂盒(细胞培养上清) 货号EEKC-10001
同等体积的细胞上清,使用本试剂盒提取的外泌体蛋白浓度至少要比超速离心法提取的高5~10倍,适合需要大量外泌体的实验研究。
四、我们的优势
服务优势:
(1)最优的提取方法,外泌体的纯度高(particle数与蛋白含量比值更高);
(2)三重鉴定,结果真实唯一;
(3)周期快,性价比高。
平台优势:
集目标细胞培养、外泌体提取、鉴定、及后续功能性实验于一体的一站式服务。
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